產(chǎn)品信息

名稱Hs 578T(人乳腺癌細(xì)胞)(STR鑒定正確)

別稱HS 578T;Hs-578T;HS-578T;Hs_578t;Hs-578-T;HS-578-T;Hs 578.T;HS578T;Hs578T;Hs578t;HS0578T;578T;HS578;Hs578;Homo sapiens No.578,tumor cells

種屬人

年齡（性別）女；74歲

組織來(lái)源乳腺癌

生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

背景描述Hs 578T細(xì)胞源自乳房癌，它與正常成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞株Hs 578Bst起源于同一位患者。Hs 578T細(xì)胞**初是多角形的，但在傳代過(guò)程中選擇并克隆了星形的細(xì)胞形態(tài)。電鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，Hs 578T細(xì)胞內(nèi)酪蛋白顆粒聚集、橋粒緊密連接、脂質(zhì)體和光滑內(nèi)質(zhì)網(wǎng)小泡。Hs 578T細(xì)胞與Hs 578Bst細(xì)胞一樣，未檢測(cè)到雌激素受體和內(nèi)生病毒。

生物安全等級(jí)1

生長(zhǎng)培養(yǎng)基DMEM＋0.01mg/ml Insulin＋10%FBS＋1%P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3次/周

倍增時(shí)間~36-54 hours

凍存條件凍存液：55%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度：液氮

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃

致瘤性No,in immunosuppressed mice.Yes,in semisolid medium.

保藏機(jī)構(gòu)ATCC;CRL-7849 ATCC;HTB-126 BCRC;60120 DSMZ;ACC-781 ECACC;86082104

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基；北美胎牛血清，10%；添加0.01mg/ml牛胰島素；雙抗，1%。

2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。**天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。