PIPES(哌嗪N,N`二(2 乙磺酸))是一種兩性緩沖液,緩沖PH范圍在 7.2 - 7.4,不溶于水,但可溶于氫氧化鈉水溶液。 PIPES包含在Good’s緩沖液中,廣泛應用于疫苗生產,組織培養、陽離子功效的研究、以及生物物質的分離技術等方面。
PIPES緩沖劑的基本介紹
PIPES與其它緩沖劑不同,例如:BIS-TRIS、BICINE,它和很多金屬離子無法形成穩定的化合物,所以非常適用于作為金屬離子溶液中的緩沖劑。
PIPES的pKa值有兩個,分別為1pKa和2.67pKa,1pKa在環境溫度處于25°C下為6.76,接近生理pH,緩沖范圍在6.1-7.5,這就適用于細胞培養工作,2.67pKa在25°C下,緩沖范圍為1.5-3.5。
PIPES可以應用在哪里
PIPES可應用于磷酸纖維素色譜純化微管蛋白以及凝膠過濾法純化重組GTP,結合蛋白ARF1和ARF2,作為緩沖液從大腸桿菌中結晶轉酮酶。不過值得注意的是,由于PIPES可以形成自由基,并不適用于氧化還原體系。
PIPES緩沖劑的優勢
1、動植物組織樣品的戊二醛固定可導致脂質損失,有明顯的形態變化,當使用PIPES緩沖戊二醛固定劑時,脂質損失和偽影**小化。
2、如果固定在伴草酸鹽緩沖的戊二醛中進行超細胞化學固定時,有可能會選擇性地喪失了堿性磷酸酶的活性。當使用PIPES作為緩沖液時,活性保留率會有明顯提高。
3、戊二醛和甲醛在PIPES緩沖液中結合,熒光顯微鏡和電子顯微鏡的真菌游動孢子的固定能達到極佳。
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